紫花苜蓿(Medicago sativa L.)是全球栽培面積最大的高蛋白飼草，因其良好的營養(yǎng)價值和口感而被譽為“牧草之王”。提高紫花苜蓿產量是最重要育種目標之一，增加種植密度以提升單位面積的產量是一種有效的解決方法。然而，高密度種植可能會觸發(fā)植物的避蔭反應(Shade Avoidance Response，SAR)，導致植株伸長生長和倒伏率增加、分蘗和分枝減少、早期開花和衰老，最終導致產量大幅降低。因此，為了實現單位面積最大產量，創(chuàng)制能夠緩解SAR的理想株型新品種是有效的解決途徑。葉柄角度(Leaf Petiole Angle，LPA)是植株結構的一個關鍵特性，也是豆科作物遺傳改良的目標性狀。在高密度種植下，直立的葉片可以更好地捕獲光線從而提高光合效率和通風，最終提高產量，但目前適應高密度種植的紫花苜蓿品種仍然非常缺乏。

近日，中國科學院昆明植物研究所青藏高原植物進化與適應專題組利用CRISPR/Cas9技術靶向敲除了紫花苜蓿的MsCLE3a，獲得5個純合突變體。Mscle3a突變體植株的葉夾角較野生型顯著減小，植株結構緊湊，分枝數與鮮重顯著增加。冷凍掃描電鏡(Cryo-SEM)結果顯示，Mscle3a突變體的葉柄遠軸面細胞顯著伸長導致LPA減小。轉錄組和qRT-PCR分析進一步揭示Mscle3a突變體中油菜素內酯生物合成基因的下調表達，這可能是調節(jié)葉夾角機制的基礎。該研究創(chuàng)制了一個LPA減小的紫花苜蓿新種質并初步解析了LPA減小的分子機制，為培育適應高密度種植紫花苜蓿新品種提供了新的材料，MsCLE3a的同源基因也有望應用于其它豆科作物以創(chuàng)制理想株型新品種。

研究成果以CRISPR/Cas9-mediated gene editing of MsCLE3a confers compact alfalfa architecture為題發(fā)表在Plant Science。

圖1 WT和Mscle3a突變紫花苜蓿的表型