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極小種群野生植物  華蓋木組培繁殖技術規(guī)程

標準起草單位：中國科學院昆明植物研究所、云南交投生態(tài)環(huán)境工程有限公司

標準歸口單位：云南省林業(yè)標準化技術委員會

標準編號：DB53/T 1426-2025

標準發(fā)布日期：2025年6月7日

標準實施日期：2025年9月7日

標準制定背景

華蓋木（Manglietiastrum sinicum）為我國特有的木蘭科 (Magnoliaceae) 單種屬植物，是被子植物中最古老的物種之一，僅分布在我國滇東南地區(qū)，為受國家重點保護的極小種群野生植物。華蓋木是研究古氣候變遷、木蘭科植物起源、演化和系統(tǒng)分類的重要物種，科學研究價值高。同時，華蓋木四季常綠，植株高大挺拔，樹冠宛若華蓋，亭亭玉立，花香濃郁，讓人心醉神迷，嫩葉朱紅如烈火，老葉翠綠有光澤，是應用前景廣闊的園林景觀植物。此外，華蓋木的木材結構細致，有綠絹般光澤，耐腐、抗蟲，是珍貴的用材樹種。

華蓋木自然狀態(tài)下結實率較低，僅為22±3%，假種皮含油量達44.94%，影響其種子萌發(fā)。此外，華蓋木的種子在野外環(huán)境中常遭受嚙齒動物與鳥類的大量取食，其萌發(fā)率受到周圍環(huán)境因素的顯著影響；其野外種群也更新困難。中國科學院昆明植物研究所應用植物組織培養(yǎng)技術，經(jīng)過10余年對華蓋木進行繁育研究，成功突破了華蓋木組培繁殖技術壁壘并解決了華蓋木種群更新困難的問題，通過應用此項技術可在短期內(nèi)快速擴大華蓋木種群數(shù)量。

制定華蓋木組培繁殖技術規(guī)程，將為華蓋木的無性繁殖提供技術支持，為促進其他木蘭科瀕危物種的人工擴繁和保護提供技術參考，對推動生物多樣性可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。

標準內(nèi)容主要結構

（一）范圍

標準規(guī)定了極小種群野生植物華蓋木（Manglietiastrum sinicum）組織培養(yǎng)的基本要求、外植體采集與處理、誘導培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、壯苗與生根培養(yǎng)、煉苗移栽等技術要求。

本標準適用于極小種群野生植物華蓋木組培繁殖。

（二）規(guī)范性引用文件

LY/T 1882-2010  林木組織培養(yǎng)育苗技術規(guī)程

（三）術語和定義

極小種群野生植物。分布地域狹窄或呈間斷分布、種群和個體數(shù)量少、人為干擾嚴重和隨時有滅絕風險的野生植物。

組織培養(yǎng)。無菌條件下，將離體的植物器官、組織、細胞以及原生質(zhì)體培養(yǎng)在人工培養(yǎng)基和人工控制的環(huán)境中，使其再生新植株的過程和技術。

外植體。用于建立植物組織培養(yǎng)的離體植物器官、組織、細胞以及原生質(zhì)體。

誘導培養(yǎng)。將消毒后的外植體接種到特定培養(yǎng)基中，經(jīng)過一段時間的培養(yǎng)，使之長出愈傷組織、頂芽、腋芽、叢芽等的過程。

增殖培養(yǎng)。離體芽苗、愈傷組織或懸浮培養(yǎng)細胞不斷倍增的培養(yǎng)過程。

生根培養(yǎng)。誘導無根離體芽苗產(chǎn)生根的培養(yǎng)過程。

瓶苗煉苗。將組培苗連培養(yǎng)容器一起移至室外接近自然環(huán)境中培養(yǎng)，提高苗木的木質(zhì)化程度，增強苗木對自然光照和溫差變化適應能力的過程。

移栽。將培養(yǎng)容器中長到適宜高度、具備合適根數(shù)與根長的生根苗，取出種植到基質(zhì)中，使苗木逐漸適應自然條件的過程。

（四）組織培養(yǎng)基本要求

培養(yǎng)基配制、消毒、接種操作、接種器械清洗與消毒、接種室及培養(yǎng)室管理執(zhí)行LY/T 1882標準，其中：外植體消毒及誘導、增殖、生根等環(huán)節(jié)涉及的轉(zhuǎn)接、切分均應于超凈工作臺進行。

培養(yǎng)室培養(yǎng)條件：溫度23—30℃,光照強度1300—1800Lux, 光照時間每天10小時。

（五）外植體采集與處理

外植體采集。2—4月、9—12月，從生長旺盛、無病蟲害植株的當年生枝條上采集帶芽莖段作為外植體，并記錄外植體母株、采集時間和地點等信息。

保存與運輸。采集的外植體宜當天消毒接種。若需長途運輸，控制在3天內(nèi)，75%酒精擦拭表面后，用干凈的紙巾包裹置于自封袋中，放置冰袋低溫冷藏運輸。

外植體消毒。剪去外植體上葉片，保留葉柄0.3—0.5厘米，剪成1.5—2厘米帶芽的莖段，于1%的肥皂液中浸泡10分鐘后用流動的自來水清洗干凈；用75%酒精消毒8—10秒，無菌水沖洗3次后，用0.1%氯化汞溶液消毒5—8分鐘，再用無菌水沖洗3—5次。

（六）誘導培養(yǎng)

誘導培養(yǎng)基配方。MS 6-BA 0.5—3.0毫克/升 IAA 1.0毫克/升 蔗糖30克/升 瓊脂5克/升，pH5.8。

接種要求。將消毒外植體葉柄和莖段兩端切去0.2—0.5厘米，按照芽生長方向朝上原則，豎直或者傾斜接種于誘導培養(yǎng)基中，每個培養(yǎng)瓶接1個芽或者莖段，誘導腋芽和頂芽生長。

褐化控制。14天內(nèi)每天更換外植體在培養(yǎng)容器內(nèi)接種的位置或者轉(zhuǎn)接于新的培養(yǎng)基。

（七）增殖培養(yǎng)

增殖培養(yǎng)基配方。MS 6-BA 0.0—2.0毫克/升 IAA 0.1—1.0毫克/升 蔗糖30克/升 瓊脂5克/升，pH5.8。

接種要求。腋芽和頂芽生長至2—3厘米時，將其切成帶1—2個節(jié)的莖段，接種于增殖培養(yǎng)基，增殖周期50—60天。

（八）壯苗與生根培養(yǎng)

壯苗與生根培養(yǎng)基配方。MS IBA 0.1—2.0毫克/升 IAA 0.1—2.0毫克/升 蔗糖30克/升 瓊脂5克/升，pH5.8。

壯苗與生根培養(yǎng)操作。增殖培養(yǎng)的莖段生長至3—4厘米時，切下生長健壯、形態(tài)正常、帶頂芽、長2—3厘米的莖段進行壯苗與生根培養(yǎng)。

（九）煉苗移栽

組培瓶苗質(zhì)量要求。植株生長健壯、葉形葉色正常，具2—3片展開葉；株高3—5厘米；根數(shù)量多于2條，根長1—2厘米。

閉瓶煉苗。將組培瓶苗移植于遮光率60%—70%、濕度＜50%的大棚內(nèi)，閉瓶煉苗7—10天，使組培苗適應自然光照和晝夜溫差。

移栽。基質(zhì)按珍珠巖：腐殖土：生紅土=1：1：2體積比配制，用多菌靈800倍液噴施基質(zhì)并與土混拌均勻，pH5.8—6.8，覆蓋塑料膜密封消毒7天。準備規(guī)格為6厘米×7厘米栽培容器，將煉苗后的瓶苗取出，洗凈根部培養(yǎng)基，及時栽入容器中，澆透定根水。移栽到大棚后30天內(nèi)，溫度20℃—30℃，遮光率75%—85%，空氣濕度70%—80%，基質(zhì)含水量40%—50%；移栽30天后，逐步增加光照強度，每7天噴施70%甲基托布津可濕性粉劑800倍液1次和全營養(yǎng)素葉面肥500倍液1次，連續(xù)噴施4—5次。

出圃要求。移栽培育1年，生長健壯，苗高≥20厘米，地徑≥0.2厘米。

標準實施意義

該標準的發(fā)布實施，為華蓋木組培繁殖提供了技術規(guī)范，對促進華蓋木種質(zhì)資源保存、種群恢復及利用，維護生物多樣性具有重要意義。

來源：云南省林業(yè)和草原局

作者：云南省林業(yè)標準化技術委員會   中國科學院昆明植物研究所